Which melting point of paraffin is the best? / Który punkt topnienia parafiny jest najlepszy?

There are various types of embedding medium but one of the most common is paraffin. It is mostly because of its solid structure at room temperature and wide range (as for pathology use) of a melting point from 45-62 deg C. Besides the process is very rapid, allowing sections to be prepared within 16 hours, tissue blocks and unstained mounted sections may be stored in paraffin for an indefinite period of time after impregnation without considerable tissue destruction and at last, many staining procedures are possible with good results. Surely there are as well many disadvantages but this is not a thing which I would like to focus on today. The question I would like to ask is how to choose the best melting point of paraffin for Your laboratory? Has it always to be 56-58 deg C? After clearing process, the tissue is submerged in minimum two more changes of melted paraffin wax, either in a paraffin oven or an incubator, which has been regulated at 2 -5 deg C above the melting point. In a laboratory with room temperature ranging from 20 – 24 deg C, paraffin wax with a melting point of 54 – 58 deg C is indicated. If the laboratory temperature is between 15 – 18 deg C, the melting point of wax to be used should be between 50 – 54 deg C. Although, which paraffin to choose? Of three methods of paraffin wax impregnation available, manual, Elliot Bench-type processor and vacuum processor, the last one is the fastest. Nevertheless, we need to remember that the larger and denser tissue blocks (e.g. bones, fibroid, brain) usually require longer periods and more frequent changes of wax. However, there is a risk associated with, since prolonged treatment in melted paraffin causes shrinkage and hardening of tissues, making cutting difficult. The tissue should not be left in the medium for longer periods of time than is necessary. Infiltration in overheated paraffin (above 60 deg C) will also produce shrinkage and hardening of tissues and destroy lymphoid tissues completely. To avoid this, the paraffin oven must be maintained at a temperature 2 to max 5 deg C above the melting point of paraffin to be used for impregnation. For high-quality performance would be best to use different processors for various tissue. This is of course possible in bigger departments. For the smaller one, there are fewer possibilities and reasonable is to choose the paraffin with the range between 54-58 deg C. We need to remember as well about specifics of work. If in the laboratory are processed only bones then would it be good to choose medium with ca. 60 deg C but if there are almost only fetal or areolar tissue then it is acceptable to use 45-50 deg C type. Summarizing: 1) The paraffin with the melting point of 56-58 deg C isn't the perfect middle at all. 2) If You are processing mostly soft tissue use lower-medium of melting point paraffin like 52-54 deg C 3) If You are processing mostly hard tissue, use higher range paraffin like 58-60 deg C 4) Don't keep Your tissue long time after impregnation in the chamber. 5) The thoughtful choice will keep Your work faster, more certain and more economical. Which paraffin do You use and why?

-------------------------------------------------------------- Istnieje wiele typów mediów do impregnacji tkanek ale jedną z najbardziej popularnych jest parafina. Głównie z powodu solidnej struktury w temperaturze pokojowej oraz szerokiego zakresu topnienia (od 45-62 st C). Ponadto cały proces jest dzięki niej bardzo szybki, a zaimpregnowany materiał tkankowy może być przechowywany przez nieograniczony czas bez wyraźnego zniszczenia, pozwalając na diagnostykę choćby po kilku latach. Oczywiście istnieje także wiele wad dotyczących używania parafiny, ale nie jest to coś na czym chciałbym się dzisiaj skupić. Pytanie, które chciałbym zadać, to w jaki sposób dobrać zakres temperatur medium do Waszych laboratoriów? Czy zawsze musi to być 56-58 st C? Po przeprowadzieniu przez szeregi ksylenu lub jego substytutów, tkanka powinna przejść przynajmniej dwa etapy impregnacji w podgrzewarce do parafiny lub inkubatorze, który będzie ustawiony 2 – 5 st C powyżej temperatury jej topnienia. Trzeba także pamiętać, że temperatura otoczenia także ma znaczenie i gdy sięga 20-24 st C punkt topnienia parafiny powinien wynosić 54-58 st C, natomiast gdy temperatura otoczenia jest niższa, to odpowiednio mniej. Zatem, którą parafinę wybierać? Spośród trzech metod impregnacji: manualnej, w procesorze karuzelowym i procesorze próżniowym, ten ostatni jest najszybszy. Niemniej jednak musimy pamiętać, że im większy i bardziej gęsty fragment tkanki (np. kości, tkanka włóknista, mózg) tym więcej potrzebujemy czasu na kolejne etapy i częściej musimy zmieniać medium. Jednakowoż występuje z tym związane ryzyko, a mianowicie zbyt długie przetrzymanie bloczka, może spowodować jego kurczenie się i twardnienie, które przyczyni się do trudności w krojeniu. Przegrzewanie parafiny daje takie same efekty, a ponadto może niszczyć węzły chłonne. Aby tego uniknąć trzeba pamiętać o wspomnianym wcześniej utrzymywaniu temperatury 2 - 5 st C powyżej punktu jej topnienia. Dla utrzymania najwyższej jakości byłoby idealnie używać różnych procesorów do różnych tkanek, ale to oczywiście jest możliwe tylko w niektórych zakładach. Dla tych mniejszych, istnieje mniej możliwości i oczywiście najbardziej racjonalne jest wybranie pomiedzy zakresami 54-58 st C. Musimy pamiętać także o specyfice pracy. Jeśli badane są głównie kości, wtedy lepiej korzystać z parafiny o punkcie topnienia około 60 st C, ale gdy głównymi tkankami są np. łożysko czy tkanka łączna, wtedy zdecydowanie sensowniej jest używać parafiny z zakresu 45-50 st C. Podsumowując: 1) Parafina z punktem topnienia 56-58 st C nie jest idealnym środkiem. 2) Jeśli badacie głównie tkanki miękkie to lepiej używać parafiny o punkcie topnienia nieco poniżej średniej, jak 52-54 st C. 3) Jeśli badacie głównie tkanki twarde, wtedy lepiej używać parafiny z punktem lekko powyżej średniej, jak 58-60 st C. 4) Nie trzymajcie bloczków w parafinie dłużej niż jest to konieczne. 5) Przemyślane decyzje w sprawie parafiny powodują, że Wasza praca będzie szybsza, pewniejsza i bardziej ekonomiczna. A Wy, jakiej parafiny używacie i dlaczego?