Positive eggnog / Pozytywny likier jajeczny

A few weeks ago I wrote about the properties that adhesives for slides must have. Those who would like to recall that topic, please visit the website. There will probably be a topic on how to create such glue in the future. Today, due to the fact that we are during of preparing for Christmas and the positive energy is spreading around, we will prepare ourselves… positively charged sllides. Oh yeah!

Once upon a time, when I was still a very little employee of a pathology department, I was convinced that the silanized or polylysine slides come from factories where there is a very difficult procedure in which thousands of chemists create complicated recipes and the slides are prepared by hand one after another. Then, when I asked the first question about this type of glass, I heard from an experienced technician (cherish them, they're a treasure that will disappear soon) "At first we mixed eggs with glycerol and soaked the glass in it. When they dried up they were good."

Well, today I know it's 2/3 of the procedure. But when we add sodium salicylate, everything is correct. It is no secret today how to produce slides for immunohistochemistry. It is true that it takes a bit of time, but if instead of buying such slides, producing them for your own needs, you would easily save an extra money for additional employee or rises. We are talking here when the demand is high.

In fact, you can adapt the stainer in an open system and prepare several dozen slides overnight. The costs in the case of APES slides are actually the price of the slides themselves, as reagents are, per glass or even a package, a matter of pennies.

But let's deal with the merits and finally do something positive. At the very beginning, the slides should be cleaned very well. We need some kind of detergent or 2N NaOH solution for this. Then we have to rinse them well in distilled water and dry them. The next step will be to decide whether we want APES or Polylysin slides. There are many possibilities for both types of glass with different small details, but what's most important are:

Polylysine slides:

The slides should be sprayed with 0.01% polylysine for 15 - 45 minutes, then rinsed well in distilled water and dried.

Sylanized Slides (APES)

Here, you should also spray or immerse the reagent, which is 2% 3-Aminopropyltrietoxysilane dissolved in acetone, and wait from 5 seconds to 45 minutes (depending on your needs). Then, rinse in pure acetone several times, dry and such slides are ready for use or to store.

Don't expect the procedure to come out the first time. You will probably need to fine-tune it a bit, but the certainty of the product and the satisfaction with knowing how it works is huge. I describe it on the basis of myself of course.

... And so we get a lot of positive slides in this positive time :)

Source:

1) Kiernan, J A., (1999). Strategies for preventing detachment of sections from glass slides. Microscopy Today v. 99-6, p. 22-24.

2) Thibodeau, T R, Shah, I A, Mukherjee, R & Hosking, M B,, (1997). Economical spray-coating of histologic slides with poly-L-lysine. Journal of Histotechnology, v. 20, p. 369-370

------------------------------

Kilka tygodni temu pisałem o właściwościach, jakie muszą posiadać kleje do szkiełek. Tych, którzy chcieliby przypomnieć sobie tamten temat, zapraszam na stronę. Prawdopodobnie pojawi się w przyszłości jeszcze temat jak taki klej stworzyć. Dziś, z racji tego, że jesteśmy w czasie przygotowań do świąt, a pozytywna energia roztacza się wkoło, przygotujemy sobie… pozytywnie naładowane szkiełka. Oh Yeah!

Dawno, dawno temu, kiedy byłem jeszcze bardzo małym pracownikiem zakładu patomorfologii byłem przekonany, że szkiełka sylanizowane czy polilizynowe pochodzą z fabryk, w których zachodzi bardzo trudna procedura, podczas której tysiące chemików tworzy skomplikowane receptury, a szkiełka są przygotowywane ręcznie jedno po drugim. Po czym, gdy zadałem pierwsze pytanie dotyczące tego typu szkiełek, usłyszałem od doświadczonego technika (ceńcie takich, to skarb, który niedługo zniknie) „Na początku mieszaliśmy jajka z glicerolem i moczyliśmy w tym szkiełka. Kiedy wyschły były dobre.”

Cóż, dziś wiem, że to 2/3 procedury. Ale jak dodamy salicylan sodu to już wszystko się zgadza.

Nie jest żadną tajemnicą dziś w jaki sposób wyprodukować szkiełka do immunohistochemii. Co prawda zajmuje to odrobinę czasu, ale gdyby zamiast kupować takie szkiełka, produkować je dla własnych potrzeb, to spokojnie zaoszczędziłoby się na dodatkowy etat. Mówimy tu o przypadku gdy zapotrzebowanie jest duże.

Na dobrą sprawę, można do tego przystosować barwiarkę w systemie otwartym i przygotować sobie kilkadziesiąt szkiełek przez noc. Koszty w przypadku szkiełek APES to właściwie cena samych szkiełek, gdyż odczynniki to, w przeliczeniu na szkiełko czy nawet paczkę, kwestia groszowa.

Zajmijmy się jednak meritum sprawy i zróbmy wreszcie coś pozytywnego.

Szkiełka na samym początku należy bardzo dobrze oczyścić. Potrzebujemy do tego jakiegoś detergentu lub rozwtoru 2N NaOH. Następnie musimy je dobrze wypłukać w wodzie destylowanej i wysuszyć. Kolejnym etapem będzie zdecydowanie się na to czy chcemy szkiełka APES czy Polilizynowe. Na obydwa typy szkiełek istnieje wiele możliwości różniących się drobnymi szczegółami, ale to co jest najważniejsze to:

Szkiełka Polilizynowe

Na szkiełka należy rozpylić 0,01% polilizyny na 15 – 45 min, następnie dobrze wypłukać w wodzie destylowanej i wysuszyć.

Szkiełka Sylanizowane (APES)

Tutaj również należy rozpylić lub nakroplić odczynnik którym jest 2% 3-Aminopropylotrietoxysilan rozpuszczony w acetonie i poczekać od 5 sek do 45 min (w zależnosci od potrzeb). Następnie wypłukujemy w czystym acetonie kilka razy, suszymy i takie szkiełka są gotowe do użycia.

Nie spodziewajmy się, że procedura wyjdzie za pierwszym razem. Prawdopodobnie będzie trzeba trochę ją dopracować do własnych potrzeb, niemniej jednak pewność produktu oraz satysfakcja z wiedzy w jaki sposób to działa, jest ogromna. Opisuję to na podstawie siebie oczywiście.

… I tak otrzymujemy dużo pozytywnych szkiełek w ten pozytywny czas :)

źródło:

1) Kiernan, J A., (1999). Strategies for preventing detachment of sections from glass slides. Microscopy Today v. 99-6, p. 22-24.

2) Thibodeau, T R, Shah, I A, Mukherjee, R & Hosking, M B,, (1997). Economical spray-coating of histologic slides with poly-L-lysine. Journal of Histotechnology, v. 20, p. 369-370