Adhesives for slides / Kleje do szkiełek

Mounting of the coverslip is the final step of slide preparation before the diagnostic evaluation. The method is simple, quick and virtually hassle-free - take a stained slide, put some adhesive, cover and voila, you’re ready to go. But the truth of the matter is that even this step has room to improve in order to achieve the highest quality.

There are plenty of different mounting media on the market. How to determine which one is the best for achieving an optimal result? And does it really matter that much? Adhesives are divided into two main types: resinous and aqueous. For both types, one of the most important factors to account is the Refractive Index (RI). It’s worth to remember that the light travels through materials of various densities before finally meeting the eye.

Since the refractive index of the glass is ~1.5 it is best to use a mounting medium with the same or slightly lower IR. This way the clarity and contrast of the image are at its peak point, deviation from the 1.5 value makes the image blurry, straining one’s eyes and making a slide harder to properly evaluate. When selecting a mounting medium it’s best to take to account the following criteria: • The refractive index should be as close as possible to that of the glass (~1.5) or slightly less because it brings better focus. • It should be colourless and transparent. • It should not cause the stain to diffuse or fade. • It should not interfere with special or immunohistochemical stains. • It should be dry relatively quickly to a non-stick consistency should not crack during the process. • It should be able to completely permeate and fill tissue interstices. • It should have no adverse effect on tissue components. • It should be resistant to contamination (particularly microorganism growth). • It should protect the specimen from physical damage and chemical activity (oxidation and changes in pH levels). • It should be completely miscible with dehydrant or clearing agent. Or do you have your own criteria? ------------------------------------------------------------- Zaklejanie szkiełek jest ostatnim krokiem przygotowywania szkiełek do dalszej diagnostyki. Metoda jest prosta, szybka i właściwie bezproblemowa - weź zabarwione szkiełko, nałóż odrobinę kleju, nakryj i voilla. Ale nawet tutaj mamy możliwość zadbania o najwyższą jakość.

Na rynku znajduje się ogromna ilość różnych mediów zaklejających. Jak zadecydować, który będzie miał najlepszy wpływ na dalszą diagnostykę? Czy naprawdę ma to znaczenie? Kleje są podzielone na dwa głowne rodzaje: żywiczne i wodne. W obydwóch najważniejszym czynnikiem jest współczynnik załamania światła (RI). Warto pamiętać że światło przechodzi przez środowiska o różnej gęstości, zanim trafi do naszych oczu. Jeśli RI szkła wynosi 1,5, idealne do dalszej diagnostyki byłoby medium o takim samym współczynniku lub delikatnie mniejszym. To da perfekcyjną przejrzystość i kontrast. Zbyt daleko od tego punktu w obydwie strony spowoduje, że właściwości będą gorsze, co może prowadzić do rozmazania obrazu, przez co praca staje się bardziej męcząca. Dobierając medium zaklejające najlepiej zwrócić uwagę na następujące właściwości: • RI powinno być jak najbliżej szkła, tj. 1,5 i lepiej mieć RI trochę niższe niż wyższe, ponieważ zapewnia lepszą ostrość. • Powinien być bezbarwny i przezroczysty. • Nie powinien powodować rozpraszania się ani blaknięcia barwień. • Powinien wyschnąć do formy nieprzywierającej konsystencji i stosunkowo szybko twardnieć. • Powinien być w stanie całkowicie przeniknąć i wypełnić szczeliny w tkance. • Nie powinien mieć negatywnego wpływu na składniki tkanki. • Powinien być odporny na zanieczyszczenia (szczególnie rozwój mikroorganizmów). • Powinien chronić skrawki przed uszkodzeniem fizycznym i działaniem chemicznym (utlenianie i zmiany pH). • Powinien być możliwy do całkowitego wymieszania z odczynnikami lub środkiem czyszczącym. A może posiadacie własne kryteria?

Picture - Bancroft's theory and practice of Histological Techniques 7th Edition, page 46